荧光素酶标记的人胰腺癌细胞capan2胰腺原位接种肿瘤模型

2023-12-21 16:04:08

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摘要：胰腺癌是一种恶性程度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1%，是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌恶性度高，病程短，一般出现症状时已属晚期，并很快发生转移，侵犯邻近脏器。胰头癌与胰体尾癌的转移途径不完全一致，胰头部癌常侵犯到胆总管、十二指肠、胃及腹腔动脉，其淋巴转移途径主要是经肠系膜上动脉周围淋巴结向五动脉周围淋巴结转移。胰体、尾部癌常沿神经鞘向腹腔神经丛及脊髓方向转移，或沿淋巴管转移至胰上及肝门淋巴结等处。本病发病率男性高
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资源中文名称	荧光素酶标记的人胰腺癌细胞capan-2胰腺原位接种肿瘤模型
资源英文名称	（Capan-2-LUC）
疾病概述	胰腺癌是一种恶性程度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1%，是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌恶性度高，病程短，一般出现症状时已属晚期，并很快发生转移，侵犯邻近脏器。胰头癌与胰体尾癌的转移途径不完全一致，胰头部癌常侵犯到胆总管、十二指肠、胃及腹腔动脉，其淋巴转移途径主要是经肠系膜上动脉周围淋巴结向五动脉周围淋巴结转移。胰体、尾部癌常沿神经鞘向腹腔神经丛及脊髓方向转移，或沿淋巴管转移至胰上及肝门淋巴结等处。本病发病率男性高于女性，男女之比为1.5～2:1，男性患者远较绝经前的妇女多见，绝经后妇女的发病率与男性相仿。
实验动物背景信息	人胰腺癌细胞Capan-2源自一位56岁的男性白人，组织培养，呈现上皮样细胞特征；接种裸鼠后，组织病理学上类似于原发癌，肿瘤呈现高分化的腺癌样生长。人胰腺癌细胞株Capan-2取自胰腺导管腺癌，产生高水平粘蛋白MUC-1的mRNA, 低水平粘蛋白MUC-2的mRNA ,但是不表达粘蛋白MUC-3 基因。利用脂质体2000将荧光素酶表达载体pCAGGS-NEO-LUC转染Capan-2细胞,通过G418抗生素筛选到一株稳定高表达荧光素酶(LUC)的单克隆人结直肠癌细胞（Capan-2）细胞，命名为Capan-2-LUC，见图1和2。图1 荧光素酶表达载体的构建图2 荧光素酶标记的Capan-2细胞系的阳性克隆检测
模型制作方法	将对数生长期的Capan-2-LUC细胞原位接种于2只BALB/c裸鼠胰腺，接种细胞数量为1×106/只, 分别在第7,14,21,28d观察一次，观察前每只裸鼠腹腔注射荧光素底物D-Luciferin（1.5mg/10g）,饱和三溴乙醇（0.18ml/10g）麻醉后放入活体荧光影响系统摄像，Slide Book 4.0软件进行分析。模型制作采用的BALB/c裸鼠，鼠龄5周，体重15—18 g，在无特定病原体(specific—pathogen free，SPF)的饲养间饲养。
模型表型数据	分别在接种后的7、14、21、28d利用小动物活体成像系统观察裸鼠胰腺原位接种肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光，通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小，随着观察天数的增加，肿瘤的体积和发光强度增加。图2，胰腺原位接种Capan-2-LUC肿瘤生长影像分析
动物模型的评价与验证
保存方式	Capan-2-LUC细胞液氮冻存
合作方式

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