全身性Usp18基因敲除小鼠模型

2023-12-21 15:21:50

摘要：Usp18编码的蛋白属于泛素特异性蛋白酶(UBP)家族，在肝脏和胸腺高表达，并定位于细胞核。USP18蛋白是泛素样蛋白ISG15特异性蛋白酶，可有效的切割ISG15的融合，并从特定底物中移除多泛素链。Usp18也是一种干扰素刺激基因，参与IFN-I信号的负调控。研究表明在Usp18敲除小鼠中，由于Usp18的缺失，I型IFN反应过度激活，可以导致小鼠骨质减少的表型。而在细菌感染模型中，例如单核增生李斯特菌或金黄色葡萄球菌感染小鼠，USP18蛋白可以通过抑制TNF-α来促进细菌的复制；而抑制USP18功能可
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400-062-0567

标识符

CSTR:16397.09.0C01000187

资源中文名称

全身性Usp18 基因敲除小鼠模型

资源英文名称

Usp18 knockout mouse model

疾病概述

Usp18编码的蛋白属于泛素特异性蛋白酶(UBP)家族，在肝脏和胸腺高表达，并定位于细胞核。USP18蛋白是泛素样蛋白ISG15特异性蛋白酶，可有效的切割ISG15的融合，并从特定底物中移除多泛素链。Usp18也是一种干扰素刺激基因，参与IFN-I信号的负调控。研究表明在Usp18敲除小鼠中，由于Usp18的缺失，I型IFN反应过度激活，可以导致小鼠骨质减少的表型。而在细菌感染模型中，例如单核增生李斯特菌或金黄色葡萄球菌感染小鼠，USP18蛋白可以通过抑制TNF-α来促进细菌的复制；而抑制USP18功能可以通过增强TNF-α的抗菌作用来促进对原发性和继发细菌感染的控制，从而使USP18成为细菌感染治疗的靶点之一。此外发现USP18通过调节TAK1依赖的p38和JNK1/2信号通路，发挥了抑制病理性心脏重构的作用。USP18蛋白还具有抗病毒活性，以及对癌症的抑制作用。

实验动物背景信息

C57BL/6J小鼠

模型制作方法

采用Cas9进行基因敲除。

模型表型数据

全身性Usp18 基因敲除小鼠采用PCR方式进行基因敲除的鉴定。

（1）引物信息：见表1

表1. 鉴定引物序列

引物设计	引物名称	引物序列（5’-3’）	PCR 产物大小
跑胶检测Usp18 基因删除情况	F	GAAGTTGGAATGGCAGGCAG	KO：300-550 bp
跑胶检测Usp18 基因删除情况	R	TGGAAGTGCATAAGGAAGAGGTC	KO：300-550 bp
扩增Usp18 基因野生型片段	F	GAAGTTGGAATGGCAGGCAG	WT：340 bp
扩增Usp18 基因野生型片段	WT-R	AGTGCCATTAACTGCTGAGCC	WT：340 bp

测序结果：将F/R 引物扩增的PCR 产物测序确认该小鼠为Usp18 基因片段删除的杂合子（测序引物F），具体见图3。说明全身性Usp18 基因敲除小鼠构建成功。

图3. F/R 引物扩增的PCR 产物测序结果

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