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BALB／cA-nu小鼠，胸腺缺失，为第11对染色体隐性遗传，T细胞免疫缺陷，B细胞正常，具有较高的NK细胞活力，无接触GFP敏感性，无移植排斥反应。
制作稳定高表达DsRed的细胞，在荧光显微镜下呈强荧光，并且荧光均匀分布于整个细胞内，传代数次后仍能稳定高水平表达DsRed（图1）。细胞形态和未转染细胞无明显区别。
图1红色荧光标记的CACO-2肿瘤细胞
模型制作采用BALB／cA-nu裸小鼠，鼠龄6周，体重16—20g。 BALB／cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的CACO-2-DsRed肿瘤细胞，稀释至5×106cells／mL。取200μL细胞悬液进行皮下注射接种。
分别在接种的7、14、21、28和35 d观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到接种部位肿瘤发光，通过肿瘤组织发出的荧光的光子数可以确定肿瘤的大小，随着观察天数的增加，肿瘤的体积和发光强度增加(图2)。28天后肿瘤中心区域荧光降低，显示肿瘤中心出现坏死。以肿瘤细胞发射的光子数对小鼠荷瘤时间作图，得到红色荧光蛋白标记CACO-2的肿瘤细胞在裸鼠体内的生长曲线(图3)。
图2 皮下接种CACO2-DsRed肿瘤生长影像分析
图3 荧光标记肿瘤的生长曲线
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2023-12-21 16:04:12
