长期高尿酸血症慢性肾损伤模型

成年滇西亚种树鼩，18只，雌雄各半，雌性体重范围为110g~135g，雄性体重范围为120g~150g。由中国医学科学院医学生物学研究所小动物实验部提供，常规性饲养。饲养环境温度20℃～25℃，湿度40%～70%，自由饮水和采食。

氧嗪酸钾，Sigma公司产品，纯度≥97%。溶于羧甲基纤维素钠，制备成10mg/kg剂量。

成年滇西亚种树鼩，18只，雌雄各半，雌性体重范围为110g~135g，雄性体重范围为120g~150g。

将做过空白血清检测的18只树鼩随机分成对照组、30天给药组，120天给药组，各6只。雌雄各半，雌性体重均在110g~135g，雄性体重均在120g~150g。对照组每日腹腔注射（iP）1％羧甲基纤维素钠（CMC-Na）40mg/kg,给药时间为120天，给药组以同样剂量ip注射氧嗪酸钾（OA），给药时间分别为30天和120天。

给药最后一天空腹给药1h后，尾静脉采血0.8ml于1.5mlEP管中，在4℃冰箱存放1h后提取血清，4℃ 、13 000r/min离心15min，取血清，磷钨酸法测定尿酸值。

给药最后一天空腹给药1h后，尾静脉采血0.8ml于1.5mlEP管中，在4℃冰箱存放1h后提取血清，4℃ 、13 000r/min离心15min，取血清，苦味酸比色法肌酐测试盒检测肌酐值。

给经磷钨酸法试剂盒检测，树鼩30天给药组、120天给药组ip注射给药氧嗪酸钾前后血清尿酸值均见明显升高，120天给药组与30天给药组相比较给药前后血清尿酸升高趋势比较接近。见表1 氧嗪酸钾致各剂量组血清尿酸变化

表1 血清尿酸值结果

经苦味酸比色法肌酐测试盒检测，树鼩30天给药组血清肌酐含量给药前后血清肌酐含量由73.10±18.71μmol/L变为75.74±7.98μmol/L，几乎没有变化（P=0.3565>0.05）无统计学意义,与对照组比较差异几乎没有（P>0.05）无统计学意义；120天给药组给药前后血清肌酐含量由62.45±14.63μmol/L升高至98.91±17.29μmol/L，（P=0.0443<0.05）有统计学意义，与对照组比较有所升高，（P=0.0049<0.05）有统计学意义。与30天给药组比较有所升高。结果见表2 氧嗪酸钾致各剂量组血清肌酐变化

表2血清肌酐值结果

用10％甲醛固定的树鼩肝脏、肾脏由昆明金域医学检验所做病理切片。由病理血诊断报告结果可知120天给药组肾小球毛细血管扩张、充血（1-5%）。部分肾小管上皮细胞空泡变性（5-10%）、水肿变性（5-10%），肾小管蛋白管 型（1-5%）。肾间质淋巴细胞浸润（1-5%）。结果见图1。

图1

给药结束后，提取肾脏、肝脏、小肠RNA，逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantification，qPCR）检测LCN2、TGF-β、NF-ΚB、OAT1、OAT3在不同组别的肾脏中mRNA的表达变化， OAT1、OAT3在树鼩肝脏、小肠mRNA的表达变化。

结果显示给药组与对照组比较LCN2、TGF-β、OAT1在肾脏表达上调，OAT3、NF-κB变化不显著，肝脏的OAT1、OAT3mRNA表达下调，小肠的OAT1、OAT3mRNA表达变化不显著。本研究探索了LCN2、TGF-β、NF-ΚB、OAT1、OAT3基因的表达变化，为后续研究慢性高尿酸血症所引起的肝肾损伤的分子机制打下基础，建立动物模型。