全身性Mbd4基因敲除小鼠模型

2023-12-21 15:21:52

摘要：Mbd4基因编码的蛋白质是一种多结构域蛋白，包括一个C端单功能胸腺嘧啶-尿嘧啶DNA糖基化酶和一个N端甲基- cpg结合域（MBD），其甲基- cpg结合域将酶定位于基因组的富含cpg的区域，启动碱基切除修复(BER)，修正由于5-甲基胞嘧啶(5MeC)或胞嘧啶脱氨产生的T:G或U:G错配。研究表明，MBD4介导的DNA修复可能对慢性炎症组织的致癌作用非常重要。在人类中，MBD4的序列和表达的改变与癌症风险的升高有关。MBD4 Glu346Lys多态性与结肠直肠癌、食管鳞状细胞癌和肺腺癌的风险增加相关。在
注：因业务调整，暂不接受个人委托测试。

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标识符

CSTR:16397.09.0C01000190

资源中文名称

全身性Mbd4基因敲除小鼠模型

资源英文名称

Mbd4 knockout mouse model

疾病概述

Mbd4基因编码的蛋白质是一种多结构域蛋白，包括一个C端单功能胸腺嘧啶-尿嘧啶DNA糖基化酶和一个N端甲基- cpg结合域（MBD），其甲基- cpg结合域将酶定位于基因组的富含cpg的区域，启动碱基切除修复(BER)，修正由于5-甲基胞嘧啶(5MeC)或胞嘧啶脱氨产生的T:G或U:G错配。研究表明，MBD4介导的DNA修复可能对慢性炎症组织的致癌作用非常重要。在人类中，MBD4的序列和表达的改变与癌症风险的升高有关。MBD4 Glu346Lys多态性与结肠直肠癌、食管鳞状细胞癌和肺腺癌的风险增加相关。在一些自身免疫性疾病中也观察到MBD4的多态性或表达改变，这表明MBD4与反常的免疫反应之间可能存在联系。在小鼠实验表明Mbd4可以抑制溃疡性结直肠炎症相关的结肠癌小鼠模型的发病率和死亡率：Mbd4−/−小鼠比野生型小鼠的生存时间更短，死亡时的肿瘤负荷更大，临床症状更严重。组织病理学检查也发现Mbd4−/−小鼠的炎症和组织损伤更严重。

实验动物背景信息

C57BL/6J小鼠

模型制作方法

基因敲除构建设计

模型表型数据

全身性Muc2基因敲除小鼠采用PCR方式进行鉴定。

（1）引物信息：见表1

表1. 鉴定引物序列

引物名称	引物序列（5’-3’）	PCR 产物大小
F	TCAGACCCCCAGAGTCCATC	KO：336 bp
R	ACCTTGCTGGCTGCTACGTA	KO：336 bp
F	TCAGACCCCCAGAGTCCATC	WT：345 bp
WT-R	ACAAAAAAACCCTCAAACCATC	WT：345 bp

测序结果：将F/R 引物扩增的PCR 产物测序确认该小鼠为Mbd4基因片段删除的杂合子（测序引物F），具体见图3。说明全身性Muc2基因敲除小鼠构建成功。

图3. F/R 引物扩增的PCR 产物测序结果

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